Evaluación de los métodos de estabilidad e inactivación de #SARSCoV2
El nuevo coronavirus SARS-CoV-2 es el agente causante de la enfermedad respiratoria aguda COVID-19, que se ha convertido en una preocupación mundial debido a su rápida propagación. El trabajo de laboratorio con SARS-CoV-2 en un entorno de laboratorio se calificó al nivel de bioseguridad 3 (BSL-3) nivel de biocontención. Sin embargo, ciertas aplicaciones de investigación, en particular en biología molecular, requieren una desnaturalización incompleta de las proteínas, lo que podría causar problemas de seguridad al manipular muestras contaminadas. En este estudio, evaluamos los tampones de lisis que se utilizan comúnmente en los laboratorios de biología molecular por su capacidad para inactivar el SARS-CoV-2. Además, se analizó la estabilidad viral en medios de cultivo celular a 4 ° C y en superficies de vidrio y plástico en exhibición utilizadas en el entorno de laboratorio. Además, evaluamos métodos de inactivación químicos y no químicos, incluida la inactivación por calor, la luz UV-C, la adición de etanol, acetona-metanol y PFA, que podrían usarse como un paso de inactivación posterior en caso de inactivación insuficiente. Se infectaron células susceptibles Caco-2 y Vero con SARS-CoV-2 pretratado y se determinó la dosis de infección del cultivo de tejidos 50 (TCID50) usando tinción con violeta cristal y microscopía. Además, los lisados de las células infectadas y el virus que contenía el sobrenadante se sometieron a análisis de RT-qPCR. Hemos encontrado que el tiocianato de guanidina y la mayoría de los tampones de lisis que contienen detergentes probados fueron eficaces en la inactivación de SARS-CoV-2, sin embargo, el tampón de lisis M-PER que contenía un detergente patentado no logró inactivar el virus. En conclusión, se requiere una evaluación cuidadosa de los métodos de inactivación utilizados, especialmente para los tampones no desnaturalizantes. Es posible que sean necesarios pasos de inactivación adicionales antes de retirar las muestras virales lisadas de BSL-3.
REFERENCIA:
Widera, Marek et al. Evaluation of stability and inactivation methods of SARS-CoV-2 in context of laboratory settings. Medical microbiology and immunology, 1–10. 1 Jul. 2021, doi:10.1007/s00430-021-00716-3
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Widera, Marek et al. Evaluation of stability and inactivation methods of SARS-CoV-2 in context of laboratory settings. Medical microbiology and immunology, 1–10. 1 Jul. 2021, doi:10.1007/s00430-021-00716-3
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