El desarrollo de protocolos de diagnóstico seguros para trabajar con muestras clínicas de SARS-CoV-2 en el nivel de bioseguridad 2 (BSL2) requiere comprender el efecto del tratamiento térmico en la viabilidad del SARS-CoV-2 y la sensibilidad de la RT-PCR posterior. En este estudio, calentar SARS-CoV-2 / England / 2/2020 a 56 ° C y 60 ° C durante 15, 30 y 60 min redujo el título del virus entre 2,1 y 4,9 log10 ufp / ml (según lo determinado por el ensayo de placa) . No se produjo una inactivación completa y hubo una variabilidad significativa entre las repeticiones. El virus viable se detectó mediante ensayo de placa después del tratamiento térmico a 80 ° C durante 15 o 30 min, pero no 60 o 90 min. Después del tratamiento térmico a 80 ° C durante 60 min, el virus infeccioso solo se detectó mediante un cultivo de virus más sensible. No se detectó ningún virus viable después de calentar a 80 ° C durante 90 min o 95 ° C durante 1 o 5 min. La sensibilidad de la RT-PCR no se vio comprometida por el calentamiento a 56 ° C y 60 ° C. Sin embargo, la sensibilidad de la RT-PCR se redujo (aumento ≥3 del valor Ct) después de calentar el virus a 80 ° C durante 30 min o más, o 95 ° C durante 1 o 5 min. En resumen, encontramos que la eficacia de la inactivación por calor varía mucho según la temperatura y la duración. Por tanto, la validación local de la inactivación por calor y sus efectos posteriores es esencial para las pruebas moleculares.
REFERENCIA:
Burton, Jane et al.
The effect of heat-treatment on SARS-CoV-2 viability and detection. Journal of virological methods, vol. 290 114087. 28 Jan. 2021, doi:10.1016/j.jviromet.2021.114087
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