Frecuente detección del virus de leucemia murina en líneas celulares

Propósito: Investigar la frecuencia de la presencia del virus de la leucemia murina xenotrópica (MLV) en líneas celulares humanas establecidas a partir de xenoinjertos de ratón y buscar la evidencia de propagación viral horizontal a otras líneas celulares.
Resultados: Seis de 23 (26%) cultivos de xenoinjerto de ADN de ratón fueron fuertemente positivos para MLV y sus secuencias tenían una homología superior al 99% con cepas de MLV conocidas. Cuatro de los cinco líquidos sobrenadantes disponibles de estos cultivos virales positivos fueron fuertemente positivos para la actividad de RT. Tres de estos líquidos sobrenadantes se estudiaron para confirmar la capacidad de infección de los viriones liberados para otras células de cultivo humano. De las 78 líneas celulares derivadas de no xenoinjertos mantenidas en las instalaciones que contienen el cultivo de xenoinjertos, 13 (17%) fueron positivas para MLV, incluyendo XMRV, una cepa de virus identificada por primera vez en tejidos humanos. Por el contrario, los 50 cultivos mantenidos en una instalación libre de xenoinjerto fueron negativos para las secuencias virales.
Metodología: Examinamos las líneas celulares de tumores de xenoinjerto de siete laboratorios independientes y 128 líneas celulares de tumores no xenoinjertados. Se examinó el ADN de la línea celular para determinar la contaminación del ADN del ratón y mediante 3 ensayos de qPCR Taqman dirigidos a las regiones gag, env o pol de MLV. La secuenciación se utilizó para la identificación de la cepa viral. Los líquidos sobrenadantes se analizaron para determinar la actividad de la transcriptasa inversa (RT).
Conclusiones: Las culturas humanas derivadas del xenoinjerto del ratón frecuentemente contienen y liberan virus MLV xenotrópicos altamente infecciosos. Los laboratorios que trabajan con cultivos humanos derivados de xenoinjertos deben ser conscientes del riesgo de contaminación con virus de ratón humano-tropical potencialmente peligrosos y su propagación horizontal a otros cultivos.

REFERENCIA:
Zhang, Yu-An et al. Frequent detection of infectious xenotropic murine leukemia virus (XMLV) in human cultures established from mouse xenografts. Cancer biology & therapy vol. 12,7 (2011): 617-28. doi:10.4161/cbt.12.7.15955
-----------------------------------------------------------
Sigue este Blog en Facebook y Twitter
-----------------------------------------------------------